PRACTICA 3: CULTIVO EN MEDIO LÍQUIDO DE MUCOSA BUCAL

1. FUNDAMENTO

 

El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos y con la ayuda de una torunda tomaremos muestra de la mucosa bucal y la introduciremos dentro del medio para que afloren los microorganismos.

2. OBJETIVO

Que crezcan bacterias en un medio adecuado para ellas.

3. MATERIAL Y REACTIVOS

Torunda, gradilla y mechero bunsen.

Cultivo de mucosa bucal.

4. PROTOCOLO

 

1. Preparar todo el material.

2. Encender el mechero bunsen para crear un ambiente de esterilidad.

3. Tomar la muestra de la mucosa bucal con la torunda.

4. Pasar la boquilla del tubo que contiene el medio líquido por el mechero para esterilizar.

5. Introducir la torunda en el medio y moverla bien por todas las paredes.

6. Romper el palo que sobresale.

 

7. Esterilizar la boquilla del tubo y cerrarlo.

5. MEDIDAS DE SEGURIDAD 

1. Es imprescindible uso de bata de laboratorio y guantes desechables.
2. Lavarse las manos con agua y jabón cada vez que iniciemos y finalicemos las prácticas.
3. La zona de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado. Desinfectar la superficie de trabajo antes y después de realizar el trabajo con lejía o alcohol (etanol 96°).
3. Los microorganismos deben manejarse siempre alrededor de la llama.
4. Extremar la precaución con el encendido del mechero Bunsen y su manipulación. 

6. RESULTADO 

Pasados unos días de incubación, podremos apreciar que han crecido microorganismos en el medio.

PRACTICA 2: OBSERVACIÓN DE MICROORGANISMOS VIVOS

Observación en fresco

1. FUNDAMENTO

Colocamos una gota de la muestra sobre el porta y lo visualizamos al microscopio de forma rápida porque la evaporación de la muestra puede alterar el movimiento de las bacterias.

2. OBJETIVO

Es una técnica rápida que permite la visualización de microorganismos vivos sin el uso de colorantes.

3. MATERIAL Y REACTIVOS

Portaobjetos, cubre, pipeta Pasteur, muestra (agua de un charco y del río Segura) y microscopio óptico.

4. PROTOCOLO    

1. Colocamos una gota de muestra en el porta.

2. Colocamos el cubre sobre la gota.

3. Visualizar al microscopio.

4. Realizamos este proceso con las dos muestras.

5. MEDIDAS DE SEGURIDAD

No debemos colocar una gran gota de muestra.

6. RESULTADO 

Muestra de agua del río Segura. x 1000

 

Muestra de agua de charco. x 1000

·         Técnica de la gota pendiente

1. FUNDAMENTO

Colocamos una gota de la muestra sobre el cubre y sobre él colocamos el porta y lo visualizamos al microscopio de forma rápida porque la evaporación de la muestra puede alterar el movimiento de las bacterias.

2. OBJETIVO

Es una técnica rápida que permite la visualización de microorganismos vivos sin el uso de colorantes.

3. MATERIAL Y REACTIVOS

Portaobjetos con excavación central, cubre, pipeta Pasteur, muestra (agua de un charco y del río Segura) y microscopio óptico.

4. PROTOCOLO    

1. Colocamos una gota de muestra en el cubre.

2. Colocamos el porta con excavación central sobre el cubre de manera que la gota quede en la zona de la excavación.

3. Visualizar al microscopio.

4. Realizamos este proceso con las dos muestras.

5. MEDIDAS DE SEGURIDAD 

1. Es imprescindible uso de bata de laboratorio y guantes desechables.
2. Lavarse las manos con agua y jabón cada vez que iniciemos y finalicemos las prácticas.
3. La zona de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado. Desinfectar la superficie de trabajo antes y después de realizar el trabajo con lejía o alcohol (etanol 96°).
4. Desechar el material contaminado en los recipientes adecuados, que serán esterilizados posteriormente. Nunca se debe tirar nada contaminado por el fregador o en la basura común.

6. RESULTADO 

Agua del río Segura x 1000. Lo que vemos en la imagen es una Diatomea.

Agua de un charco. x 1000

Como conclusión hay que destacar que mediante el método de gota pendiente se pueden observar mejor los microorganismos y en los dos tipos de agua hemos podido observar microorganismos aunque no sepamos lo que son.