1. FUNDAMENTO
La coagulasa es una enzima que convierte el
fibrinógeno en fibrina. Permite determinar la capacidad de la bacteria de
coagular el plasma por la acción de la coagulasa.
2. OBJETIVO
Se utiliza para diferenciar Staphylococcus aureus (coagulasa- positiva) de otras especies de Staphylococcus (coagulasa-negativa).
3. MATERIAL Y REACTIVOS
Tubos
de hemólisis, asa de siembra, mechero bunsen, gradilla, parafilm y baño María.
Plasma
y bacterias 3 y 7.
4. PROTOCOLO
1. Mezclar un inóculo de bacteria con 500 µl de
plasma en un tubo de hemólisis. Hacer este procedimiento con las dos bacterias.
2. Incubar durante 4 h a 35 ºC.
3. Efectuar la lectura: si se observa un coagulo es
coagulasa- positiva, si no hay es coagulasa- negativa.
5. MEDIDAS DE SEGURIDAD
1.
Es imprescindible uso de bata de laboratorio y guantes desechables.
2.
Lavarse las manos con agua y jabón cada vez que iniciemos y finalicemos las
prácticas.
3.
La zona de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado. Desinfectar la
superficie de trabajo antes y después de realizar el trabajo con lejía o
alcohol (etanol 96°).
4.
Los microorganismos deben manejarse siempre alrededor de la llama.
5.
Cuando se manipulan microorganismos hay que evitar llevarse las manos a la
boca, nariz, ojos, etc. por nuestra propia seguridad.
6.
Extremar la precaución con el encendido del mechero Bunsen y su manipulación. Abrir
las ventanas por si se produce un escape de gas del mechero Bunsen.
7.
Para lavar los tubos primero hay que meterlos en un vaso de precipitado con lejía
para eliminar las bacterias.
6. RESULTADO
Coagulasa
negativa en la bacteria 3 y 7.
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