1. FUNDAMENTO
La técnica más empleada es la tinción de Wirtz-Conklin, que se practica sobre extensiones fijadas por calor.
2. OBJETIVO
Visualización
de endosporas.
3. MATERIAL Y REACTIVOS
Asa de
siembra, Mechero bunsen, Portaobjetos, Microscopio, Torunda de algodón
Muestra:
bacteria 3, 7, ESP 1 y ESP 2.
Suero
fisiológico, Verde malaquita al 5 %, y Safranina al 0´5%.
4. PROTOCOLO
1. Hacer la extensión de la muestra,
poniendo una gota de suero fisiológico con el inóculo.
2. Cubrir los portaobjetos con verde
malaquita al 5% y calentarlos por debajo durante 5 min con una torunda con
alcohol hasta que emita vapores.
3. Lavar con agua destilada.
4. Cubrir los portaobjetos con safranina al
0´5% durante 2min.
5. Lavar, dejar secar y observar al
microscopio.
5. MEDIDAS DE SEGURIDAD
1.
Es imprescindible uso de bata de laboratorio y guantes desechables.
2.
La zona de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado.
3.
Los microorganismos deben manejarse siempre alrededor de la llama.
4. Cuando
se manipulan microorganismos hay que evitar llevarse las manos a la boca,
nariz, ojos, etc. por nuestra propio seguridad.
5.
Desechar el material contaminado en los recipientes adecuados, que serán
esterilizados posteriormente. Nunca se debe tirar nada contaminado por el
fregador o en la basura común.
6.
Tenemos que tener preparado un vaso con agua,
para cuando terminemos de usar la llama apagarla metiendo la torunda en
el vaso.
6. RESULTADO
Bacteria
ESP 1 podemos ver bacilos en cadena en rosa del género Bacillus y esporas en verde.
Es Gram-positiva.
Bacteria ESP 2 podemos ver bacilos en rosa y esporas en verde. Es Gram-positiva.
Bacteria 3 podemos ver bacilos en rosa y esporas en verde. Es Gram-positiva.
Bacteria 7 podemos ver bacilos en cadena en rosa del género Bacillus y esporas en verde. Es Gram-positiva.
